En aquesta imatge podem veure un tall a través de l’adquisició 3D d’un ratolí quasi acabat de néixer, netejat amb una barreja d’alcohol benzílic i de benzoat de benzil (BABB), un dissolvent orgànic que es fa servir per fer transparents les mostres.
El ratolí va ser tenyit amb blau de metilè (en cian) i l’autofluorescència es va mostrar en magenta. Es pot veure tot l’embrió, del cap a la cua, i hi ha vàries estructures anatòmiques visibles: parts del cervell, la medul·la espinal i el tracte digestiu, així com els òrgans interns i les extremitats.
Heura Cardona del laboratori Sharpe del Laboratori Europeu de Biologia Molecular – Barcelona (EMBL Barcelona) va proporcionar la mostra, mentre que Montserrat Coll Lladó del servei d’imatge mesoscòpica (MIF, per les seves sigles en anglès) en va processar el marcatge i neteja i va obtenir les imatges.
La Montse ens n’explica més.
“A les nostres instal·lacions, hem rebut un microscopi basat en full de llum, el LCS SPIM de Luxendo (Bruker), capaç d’obtenir imatges en 3D de grans mostres òpticament netes. Vam decidir superar els nostres límits tenyint i netejant una mostra especialment gran: un ratolí quasi acabat de néixer de més de 1,5 cm de llarg.
El repte de veritat no va ser la neteja en sí, sinó assegurar-nos de que tant la tinció com la transparència òptica fossin uniformes al llarg de tot l’organisme. Per aconseguir això, vam haver de fer diferents passos de preparació, incloent la descalcificació, la reducció del pigment (especialment als ulls) i una permeabilització exhaustiva. Gràcies a aquesta estratègia, vam obtenir una tinció uniforme i claredat al llarg de tota la mostra. Una gesta bastant extraordinària!”
En efecte, felicitats a la Montse i a tot l’equip i gràcies per compartir aquesta preciosa imatge.
